腦膜炎奈瑟菌診斷血清 C型2ml

廣州健侖生物科技有限公司

【儲藏條件】

2~8℃避光保存，在標(biāo)明的有效期內(nèi)使用。

【有效期】

24個月

【產(chǎn)品名稱】

通用名：腦膜炎奈瑟菌診斷血清英文名：antisera for N.meningitidis

【產(chǎn)品說明】

本套血清用于A、B、C、W、X、Y等6個常見血清QUN（serogroup）腦膜炎奈瑟菌的血清群鑒定，將相應(yīng)血清群腦膜炎奈瑟菌制備滅活抗原，免疫家兔所得，血清產(chǎn)品經(jīng)免疫吸附去除了非特異性凝集成分，具有效價高，特異性強(qiáng)的特點。

腦膜炎奈瑟菌診斷血清 C型2ml

【規(guī)格】

每種血清群1瓶，每瓶2ml，均為使用液。

【使用方法】

1.產(chǎn)品在使用前，由冰箱拿出，恢復(fù)溫度到室溫后使用。

2.樣品分離培養(yǎng)物，經(jīng)鏡檢和生化鑒定，確定為腦膜炎奈瑟菌后，再進(jìn)行血清分群檢測，如果未能確定為腦膜炎奈瑟菌，不宜直接進(jìn)行血清凝集檢測，以免產(chǎn)生假陽性結(jié)果。

3.待鑒定細(xì)菌在血平板或巧克力平板上，5% CO₂，培養(yǎng)48小時。

4.用酒精擦拭玻璃片。

5.用蠟筆或防水筆將玻璃片分為8個方格。

6. 在玻片每個方格的下半部分，用移液器加5%的福爾馬林溶液（基于生物安全目的）。

7. 用無菌或一次性10μl接種環(huán)挑取BAP平板上過夜培養(yǎng)的細(xì)菌菌落。

8. 在玻片上將細(xì)菌與5%的福爾馬林溶液混勻，混勻后的液體應(yīng)該不透明，在加抗血清前應(yīng)保持細(xì)菌懸液不干燥。

9. 在玻片的上方加10μl血清群特異的抗血清，同時在陰性對照側(cè)加BS或者生理鹽水。

10. 緩慢的混合細(xì)菌懸液和抗血清，使上部的抗血清和下部的細(xì)菌懸液充分混合1-2分鐘。不要做旋轉(zhuǎn)晃動，以免不同血清群的血清會相互混合污染。

11.在燈光下，黑暗背景條件下觀察結(jié)果。1-2分鐘內(nèi)呈2+及以上凝集現(xiàn)象為陽性，1-2分鐘內(nèi)呈現(xiàn)2+以下凝集現(xiàn)象為陰性。如果過了2分鐘，才發(fā)生的凝集反應(yīng)按陰性處理。

【凝集反應(yīng)的強(qiáng)度等級】

當(dāng)抗血清與細(xì)菌接觸，會引起凝集反應(yīng)，使細(xì)胞（細(xì)菌）凝集或呈簇，細(xì)胞（細(xì)菌）上清液變得清亮，細(xì)胞懸液濃度或使用的抗血清濃度不同，會產(chǎn)生不同的強(qiáng)度的凝集反應(yīng)，見圖示

4+ 所有的細(xì)胞都發(fā)生凝集，細(xì)胞懸液清亮。

3+ 75%的細(xì)胞發(fā)生凝集，細(xì)胞上清略微渾濁不清。

2+ 50%的細(xì)胞發(fā)生凝集，細(xì)胞上清略微渾濁不清。

1+ 25%的細(xì)胞發(fā)生凝集，細(xì)胞上清略微渾濁不清。

+/- 少于25%的細(xì)胞發(fā)生凝集，可見有顆粒狀的成分。

0 沒有肉眼可見的凝集，上清懸液渾濁、平滑。

【血清群確定】

1. 1-2分鐘內(nèi)，出現(xiàn)3+或4+凝集為陽性反應(yīng)（強(qiáng)陽性反應(yīng)）。對于B群腦膜炎奈瑟菌來說，如果出現(xiàn)2+及以上的凝集則可認(rèn)為陽性。

2. 陰性反應(yīng)是+/-、1+ 或 2+（弱凝集）的凝集程度。

3. 當(dāng)菌株僅與一種抗血清出現(xiàn)凝集，但和生理鹽水不凝集時才能鑒定為該種血清型。

4. 如果不能確定血清群，菌株記為不能分群腦膜炎奈瑟菌（NG）。

5. 關(guān)于不能分群腦膜炎奈瑟菌（NG）菌株。

6. 在生理鹽水中凝集，無論與任何抗血清發(fā)生強(qiáng)反應(yīng)，都應(yīng)標(biāo)記為自凝菌。

7. 在生理鹽水中不自凝，和多種血清出現(xiàn)凝集，記為NG。

8. 不和生理鹽水凝集，也不和任何一個血清凝集也記作NG。

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革蘭氏陰性菌 的病原能力通常與其細(xì)胞壁組成相關(guān)，具體說

來有脂多糖（lipopolysaccharide，又稱為LPS或者內(nèi)毒素

（endotoxin））層。在人體中，LPS可以激發(fā)一種固有免疫反應(yīng)

（innate immune response）這種反應(yīng)是通過細(xì)胞素制造和免疫

系統(tǒng)活化等來描述其特征的。比如，紅腫就是細(xì)胞素產(chǎn)生并釋放

導(dǎo)致的。因為脂多糖在革蘭氏陰性菌的細(xì)胞墻表皮，所以大多數(shù)

或舊型抗生素都不能有效抑制此類細(xì)菌。革蘭氏陰性菌，（如傷

寒桿菌，結(jié)核桿菌，痢疾桿菌等）的菌體中存在的毒性物質(zhì)的總

稱。是多種革蘭氏陰性菌的細(xì)胞壁成分，由菌體裂解后釋出的毒

素，又稱之為“熱原”。單位Eu/ml。其化學(xué)成分有磷脂多糖-蛋

白質(zhì)復(fù)合物，其毒性成分主要為類脂質(zhì)A。內(nèi)毒素位于細(xì)胞壁的zui

外層、覆蓋于細(xì)胞壁的黏肽上。各種細(xì)菌的內(nèi)毒素的毒性作用較

弱，大致相同，可引起發(fā)熱、微循環(huán)障礙、內(nèi)毒素休克及播散性

血管內(nèi)凝血等。內(nèi)毒素耐熱而穩(wěn)定，抗原性弱。可刺激機(jī)體產(chǎn)生

抗體，但無中和作用，形成抗毒素，經(jīng)甲醛處理不能成為類毒素

。
內(nèi)毒素是革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁中的一種成分，叫做脂多糖。脂

多糖對宿主是有毒性的。內(nèi)毒素只有當(dāng)細(xì)菌死亡溶解或用人工方

法破壞菌細(xì)胞后才釋放出來，所以叫做內(nèi)毒素。
內(nèi)毒素不是蛋白質(zhì)，因此非常耐熱。在100℃的高溫下加熱1小時

也不會被破壞，只有在160℃的溫度下加熱2到4個小時，或用強(qiáng)堿

、強(qiáng)酸或強(qiáng)氧化劑加溫煮沸30分鐘才能破壞它的生物活性。與外

毒素不同之處在于：內(nèi)毒素不能被稀甲醛溶液脫去毒性成為類毒

素；把內(nèi)毒素注射到機(jī)體內(nèi)雖可產(chǎn)生一定量的特異免疫產(chǎn)物（稱

為抗體），但這種抗體抵消內(nèi)毒素毒性的作用微弱。
內(nèi)毒素脂多糖分子由菌體特異性多糖、非特異性核心多糖和脂質(zhì)A

三部分構(gòu)成。脂質(zhì)A是內(nèi)毒素的主要毒性組分。不同革蘭氏陰性細(xì)

菌的脂質(zhì)A結(jié)構(gòu)基本相似。因此，凡是由革蘭氏陰性菌引起的感染

，雖菌種不一，其內(nèi)毒素導(dǎo)致的毒性效應(yīng)大致類同。這些毒性反

應(yīng)主要有：
The pathogenic capacity of gram-negative bacteria [1] is often related to their cell wall composition, specifically

To lipopolysaccharide (lipopolysaccharide, also known as LPS or endotoxin

(Endotoxin) layer. In the human body, LPS can stimulate an innate immune response

(Innate immune response) This response is made and immunized by cytokines

System activation, etc. to describe its characteristics. For example, swelling is cytokine production and release

Cause Because lipopolysaccharide is the epidermal cell wall in Gram-negative bacteria, so most

Or old antibiotics can not effectively inhibit such bacteria. Gram-negative bacteria, (such as injuries

Salmonella, Mycobacterium tuberculosis, Shigella dysenteriae, etc.) of the total presence of toxic substances

Said. Is a variety of Gram-negative bacteria cell wall composition, released by bacterial cell lysate

Su, also known as "pyrogen". Unit Eu / ml. Its chemical composition of phospholipid polysaccharide - egg

White matter complexes, the main toxic components of lipid-like A Endotoxins are most located in the cell wall

The outer layer, covering the cell wall sticky peptide. A variety of bacterial endotoxin toxicity than

Weak, roughly the same, can cause fever, microcirculation, endotoxic shock and disseminated

Intravascular coagulation. Endotoxin heat-stable, antigenic weak. Can stimulate the body to produce

Antibodies, but without neutralization, form antitoxins that can not become toxoid after formaldehyde treatment

.
Endotoxin is a component of the gram-negative bacterial cell wall called lipopolysaccharide. fat

Polysaccharides are toxic to the host. Endotoxins only dissolve when the bacteria die or use artificial ingredients

Act after the destruction of bacterial cells released, so called endotoxin.
Endotoxins are not proteins and are therefore very heat-resistant. Heat at a high temperature of 100 ° C for 1 hour

Will not be destroyed, only at a temperature of 160 ℃ for 2 to 4 hours, or with a strong base

, Strong acid or strong oxidant boiled for 30 minutes to destroy its biological activity. And outside

The toxins differ in that endotoxins can not be toxic to dilute formaldehyde solutions

The endotoxin injection into the body although can produce a certain amount of specific immune products (said

As an antibody), but this antibody counteracts the toxic effects of endotoxin weakly.
Endotoxin lipopolysaccharide molecules by the cell-specific polysaccharides, non-specific core polysaccharides and lipid A

Three parts. Lipid A is the major toxic component of endotoxin. Different Gram-negative thin

The lipid A structure of bacteria is basically similar. Therefore, any infections caused by Gram-negative bacteria

, Although different species, the toxic effects caused by their endotoxin are roughly the same. These are toxic

Should have: